在做小老鼠实验的时候，会检测很多生理代谢指标。小鼠碱性磷酸酶elisa试剂盒采用的是双抗体夹心的方法，碱性磷酸酶抗体是提前包被在试剂盒的微孔板上，只需要向微孔内添加样品、标准品、检测标记物等。

在稳定的37℃温度下，反应就在微孔内进行的。使用试剂盒检测，必然是要用到酶标仪。而酶标仪是针对特定波长的光线对样品或标准品，需要有一定的显色，才能得到对应比例的吸光度，从而读取相应的数据。

通常情况下，使用底物TMB进行显色。在过氧化酶的催化作用下，TMB在微孔板内会显色为蓝色，在酸的作用下最后还会变成黄色。经过方法的验证，酶标仪选择在450nm的波长，对溶液的检测结果是最为明显的，可以根据标准曲线，计算出样品的浓度。

elisa试剂盒做检测，看起来是比较简单的。如果操作不恰当，可能用了一盒试剂盒还是测不准。为了避免出现浪费试剂盒的情况，需要注意以下的几个问题。
1.反应的过程是有时间规定的，如果时间不到或时间过了，数据会有很大的差异的。有时候，提前几分钟或晚几分钟，就有可能得到不同的结果。试剂盒从冰箱里面拿出来，在使用之前要醒一醒，让它的温度达到室内稳定的温度。
2.在洗板的时候，要尽可能地吸干微孔内的溶液。不过，现在很多科研单位或第三方检测机构，都已经采用了自动的洗板机，避免了人工操作的额外误差。
3.很多试剂盒对光线是比较敏感的，在温度发生很大变化，都可能会引起试剂盒检测结果不准确。
4.使用elisa试剂盒的时候，要看清楚有效期。不要觉得到期的试剂盒丢了怪可惜的，经常在实验室操作的技术人员会很清楚，当试剂盒过期的时候，数据会发生变化，误差会导致结果无法使用。

科研检测的过程中很多时候，就会在检测结果上发生矛盾，进行很多次重复的实验。为了尽可能的保持检测结果的客观、准确，不少的科研单位会在自测的基础上，请第生物检测机构来代测一次来核验结果。
来源：优选生物 专业科研检测机构，有十几万种elisa试剂盒生产，欢迎来咨询，数据准确，售后无忧，价格实在很便宜啊，2023年不能错过了。