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一、污染防控措施 在执行PCR操作时，操作人员需严格遵循既定规程，以最大化减少乃至消除PCR过程中的污染风险。 01 操作区域划分： 尽管当前常规PCR操作难以实现全程单人单管的完全封闭作业，但无论条件如何，均须确保实验在三个独立区域内分阶段完成，且PCR的前处理与后处理需严格隔离： 样本制备区：专用于扩增模板的准备工作； PCR扩增区：涵盖反应体系的配制及PCR扩增过程； 产物分析区：负责凝胶电泳分析、产物成像及重组克隆的操作。

目前，无论是在国内还是全球范围内，实验动物中数量最多、应用最广泛的当属聪明、活跃且敏感的老鼠。数据显示，每年有超过2000万只动物被用于生物医学研究，其中超过90%为老鼠及其他啮齿类动物。大、小鼠成为实验首选，主要归因于以下四点： 第一，鼠类与人类基因相似度高达80%以上，每十只实验动物中约有九只是小鼠或大鼠。小鼠特别适合人类遗传病研究，而大鼠则在癌症研究与毒理学实验中表现出色。研究显示，老鼠与人类骨骼结构有99%

一、磷酸化蛋白WB怎么跑？ Western Blot作为检测蛋白质磷酸化状态的重要手段，其操作流程与非磷酸化蛋白检测相似，但磷酸化蛋白因含量稀少且易失修饰，检测难度增加。失败原因多样，包括封闭不当、抗体选择失误或样本中磷酸化蛋白含量过低。以下要点助力磷酸化蛋白实验成功。 二、磷酸化蛋白表达量评估 蛋白磷酸化受多种刺激影响，需结合文献、预实验及PhosphoSitePlus数据库，综合确定表达水平。 三、WB检测磷酸化蛋白关键点 01 样本处理优化

Co-IP全称Co-Immunoprecipitation，中文学名免疫共沉淀，是一种以抗体和抗原识别专一性为基础，用于研究蛋白质之间相互作用的经典方法。 实验流程样本制备 细胞样本：收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液和蛋白酶抑制剂冰上裂解，超声破碎，离心取上清。 组织样本：剪碎组织，按组织量加入裂解液和蛋白酶抑制剂，匀浆器匀浆，直至充分裂解，离心取上清。 细胞裂解 物预清除 (选做) 向制备好的裂解物中分别加入一定量的protein A和protein G，4℃旋转孵

Co-IP全称Co-Immunoprecipitation，中文学名免疫共沉淀，是一种以抗体和抗原识别专一性为基础，用于研究蛋白质之间相互作用的经典方法。 实验流程样本制备 细胞样本：收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液和蛋白酶抑制剂冰上裂解，超声破碎，离心取上清。 组织样本：剪碎组织，按组织量加入裂解液和蛋白酶抑制剂，匀浆器匀浆，直至充分裂解，离心取上清。 细胞裂解物预清除 (选做) 向制备好的裂解物中分别加入一定量的protein A和protein G，4℃旋转孵育

第二期课程内容： 1.宏基因组研究专题，包括宏基因组简介、建库测序、分析环境搭建、物种分类原理、centrifuge安装、数据库、三代测序宏基因组物种分类鉴定等。 2.基因表达调控研究专题，涉及RNAseq简介、原理、建库方法、不同测序平台比较、定量方法、分析环境搭建、数据质控过滤、比对、计数、可变剪切检测、基因融合检测等。 3.基因组研究专题，包括基因组拼接原理、kmer估计基因组大小、二代测序拼接算法、fasta格式文件介绍与处理、quast评

小鼠尾静脉注射技巧： 1. 将小鼠固定好,将尾巴拉直，绷紧，这是成功的第一步。 小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较轻易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。 在一些非凡的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用非凡的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃

想把GWAS和BSA的图画到一起，各位牢大有没有知道怎么实现的。

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目前，无论是在国内还是全球范围内，实验动物中数量最多、应用最广泛的当属聪明、活跃且敏感的老鼠。数据显示，每年有超过2000万只动物被用于生物医学研究，其中超过90%为老鼠及其他啮齿类动物。大、小鼠成为实验首选，主要归因于以下四点： 第一，鼠类与人类基因相似度高达80%以上，每十只实验动物中约有九只是小鼠或大鼠。小鼠特别适合人类遗传病研究，而大鼠则在癌症研究与毒理学实验中表现出色。研究显示，老鼠与人类骨骼结构有99%

生信分析代做 医学sci文章指导指导二区三区+sci多篇10+主研方向医学类，擅长生信分析，NHANES数据分析，医学sci数篇发表经验，语言图表修改，提供建议。主研方向癌症、心血管、肥胖、糖尿病，擅长机制绘图、Meta分析，医学sci数篇发表经验，可语言图表修改，提供建议。sci投稿指导。长期从事科研工作，一区sci多篇，二区三区+sci多篇10+，多个期刊的审稿专家，具有丰富的审稿经验，处理修改意见和回复的经验和技巧。心血管学，肾病学，肿瘤学，

痛风是一种由体内血清尿酸浓度持续升高引起的晶体沉积性慢性疾病，其特征是单钠尿酸盐（MSU）结晶沉积在关节和非关节结构中。动物模型对于深入研究痛风的发病机理和开发新的治疗方法具有重要意义。痛风动物模型是研究痛风发病机制和测试新治疗方法的重要工具。这些模型试图模仿人类痛风的病理生理特征，包括高尿酸血症、急性关节炎发作以及痛风石的形成。 常见的痛风动物模型 大鼠模型：大鼠是最常用的痛风动物模型之一，可以通过注

在细胞培养的世界里，有一种“李鬼”现象，即一些细胞系可能因为交叉污染、误传或标记错误，而失去了它们原本的“李逵”身份。这些“李鬼”细胞不仅会误导我们的实验结果，还可能损害我们科研工作的信誉。因此，在我们开始任何实验之前，进行细胞STR鉴定是必不可少的步骤。一、什么是STR鉴定STR（Short Tandem Repeats，短串联重复序列）鉴定是一种基于分子生物学的遗传分析技术，用于检测个体DNA中的特定重复序列。这些序列由短的、连续重复

理想的WB条带是这样的，清晰条带，均匀背景，正确分子量，一致强度，特异性强，无拖尾，可重复，曝光适中。然而现实是比较骨感的，有时候WB没有条带，这种情况一般是什么原因呢？

细胞培养皿是一种常见的实验室耗材，主要用于细胞培养和繁殖。TC处理是细胞培养皿表面处理的一种常见方法，细胞培养皿为什么需要 TC 表面处理？今天一起聊聊这个问题。如果您有细胞培养的问题可以留言! 细胞表面处理的目的是为了增强细胞的贴壁性能，使细胞更好地吸附生长及形态伸展。 TC全称是Tissue culture treated，TC处理表示该器皿经过表面的改性处理，适合贴壁细胞的培养。大部分动物细胞需要贴附在一个固相界面上才能生长，而只有亲水

今天聊下做的aPCR数据可以进行分析，能不能用这个问题，判断 qPCR 数据是否可用需要考虑以下几个方面： 1.扩增曲线：扩增曲线应该呈现出典型的 S 型曲线，且曲线应该平滑，没有明显的锯齿状或平台期。 阈值线：阈值（threshold）一般是基线的标准偏差的10倍。阈值线应该位于扩增曲线的指数增长期，且应该在曲线的中部，不应过高或过低。 2. CT 值：CT 值（循环阈值）是指扩增曲线达到阈值线所需的循环数。CT 值应该在合理的范围内，一般来说，CT

细胞计数在细胞实验中是非常常见的，大多数实验室目前使用细胞计数板进行细胞计数，细胞计数板的结构如下图所示： 实验步骤1.所用细胞密度达到一定要求后进行细胞计数铺板，提前准备好细胞计数板、盖玻片、计数器。2.弃掉原有培养基，加入1ml温浴的PBS缓冲液清洗。3.弃掉PBS缓冲液，加入胰酶消化细胞，消化时间根据细胞类型及日常经验决定。4.消化相应时间后，加入二倍体积的培养基终止消化，用移液器将细胞全部吹下，转移至离心管内。5.

转化是指将质粒DNA导入细菌的过程，通过热激、冰浴、摇菌、挑菌等过程达到质粒克隆、质粒鉴定等目的，质粒转化前需准备的试剂包括：感受态细胞、质粒、无抗生素的LB液体培养基、氨苄抗性LB固体培养基平板，耗材及实验设备包括：摇菌管、Ep管、超净台、涂菌棒、酒精灯、水浴锅等。 实验步骤:1.提前将感受态细胞放置在冰盒上解冻，准备好质粒和相应数量的1.5mL EP管。2.感受态细胞解冻后取50μL加入EP管中，再加入0.5-1μL质粒，冰浴30min。3.水浴锅

1. 如果是新收集的细胞，须用1xPBS洗涤2次，4-20℃，1600-3000rpm，3min。最后一次将上清吸走。如果是冻存于-80℃的细胞，可直接取出放置再冰上备用。 2. 如抽提的蛋白是用于常规实验，按如下方法进行操作： 收集的细胞，加入RIPA裂解液（在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM）适量（按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液），votex数秒，冰上放置30min，间或振荡，直至充分裂解，高速低温离心（4℃，12000 g，15min），将上清

为了确保Western Blot（WB）实验结果的有效性和可重复性，其中很重要的一点就是样本如何上样？通常，小伙伴们面临选择是以相同的蛋白量上样还是以相同的体积上样。每种方法都有其优势和局限性，但以等蛋白量上样通常被认为是更为严谨和科学的方法。这是因为蛋白质表达水平的变化对实验结果的解释至关重要，而等蛋白量上样可以较直接地反映这些变化。 等蛋白量上样可以比较不同样本中目标蛋白的相对含量，从而更准确地评估生物学变化或处

我今年大一专业是计算机，请问考研可以跨考到生物信息学吗，跨度大不大呀，或者说有人么别的生物类的，跨度小的，咱们生物信息研究生就业怎么样，薪资呀就业难易度之类的，求解

从凝胶中纯化DNA是DNA片段亚克隆过程中的关键步骤。多年以来已经发表了许多从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA的方法。 目前市场上最主流的试剂盒操作的核心步骤是将DNA结合到硅胶膜表面。含有DNA条带的琼脂糖凝胶块溶解在离散缓冲液(chaotropic buffer）中，这破坏了琼脂糖聚合物之间的氢键。解离的 DNA滞留在硅胶珠或膜上，经水溶液或含有低浓度盐或乙醇的缓冲液回收。 那么这些试剂盒的配方是如何呢？ 溶胶液 异硫氰酸胍 3M 乙酸钾 0.375M PH 5.0 漂

qPCR实验中通常会遇到复孔间重复性差的情况，一般有以下两种： 一、CT值很大，如CT≥30，重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布，即在有效模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随机性，直接导致复孔间的CT值差异较大。解决方法为如果融解曲线没有杂峰，无模板阴性对照同目的基因的△CT值为3 or 5以上，那CT值为准确的，可多设置几个复孔，选择重复性好的CT值参与计算。 二、CT＜30，重复性较差。这种情况一般同操作有关。可从以下几

细胞表型乃是涵盖基因及蛋白表达的多个细胞进程的聚合体，此类进程致使细胞具有特定的形态与功能。细胞表型的检测，所检测的乃是如下一系列表型：周期、增殖、凋亡、迁移、侵袭、克隆形成、自噬、EMT（上皮间充质转化）、血管生成。于细胞内部，将某一目的基因进行敲除、敲降、过表达，构建稳转株之后，与对照细胞一同，展开细胞表型的检测，察看每一项表型的变化，便可推断出该目的基因的功能。细胞周期 细胞周期是指细胞从一次分

01 实验目的 基因表达是生物学研究中的重要内容之一，而基因表达载体则是基因表达研究中不可或缺的工具。基因表达载体是一种能够将外源基因导入到细胞中并使其表达的DNA分子。在细胞内，基因表达载体可以通过转录和翻译的过程将外源基因转化为蛋白质，从而实现基因表达。 02 实验原理 表达载体是用来在受体细胞中表达外源基因的载体，原核表达载体通常为质粒，表达载体除具有克隆载体所具有的性质以外，还应具有表达元件（转录和翻译所

实验室有用于培养细胞的超净台，内置酒精灯一个。老师传授授说在打开培养瓶或培养液之前要用酒精灯的火焰快速的烧一下，目的是消毒，减少污染。自己很怀疑这样做的有效程度，因为瞬间的火焰不可能将瓶口的温度升高很多，又如何达到消毒的目的呢？在网上搜索后找到一些资料，认为不应在超净台内使用火焰。那么超净台和安全柜内到底应不应该有酒精灯。 超净台正方观点： 支持方理由如下：无菌是分等级的，超净工作台一般可以达到局部