HCV的复制周期可分为4个阶段:进入宿主细胞;HCV基因翻译,多肽链合成;HCV RNA的复制;病毒颗粒装配和释放。在第二阶段,HCV基因组RNA的翻译可产生一条由3000个以上氨基酸组成的多聚蛋白,在至少4种蛋白酶的作用下生成10种成熟的蛋白,其中NS3/4A丝氨酸蛋白酶在多聚蛋白下游4个位点处催化肽链的裂解。多聚蛋白的加工处理对形成有活性的HCV RNA复制酶非常重要,因此NS3/4A蛋白酶抑制剂主要作用于HCV的基因翻译和多肽链合成。而NS5B RNA聚合酶是HCV复制酶的主要组成部分,因此NS5B聚合酶抑制剂主要干扰HCV RNA的复制。