一、 将男性尿液收集起来，存放在阴凉处。
二、 将尿液的PH调到6.5以下。每次尿液的收集应当及时处理完，不要存放太长时间，一是尿液不新鲜尿骚味难忍，二是提炼出的尿激酶活性差，利润低。
三、 沉淀处理：尿液保持在10℃以下，将收集的男性尿用5N的氢氧化钠溶液，调pH值至9.0，揽拌均匀，静置1小时，沉淀后用胶皮管虹吸抽出上层清液，并量其体积,除去下层白色沉淀，用盐酸，酸化到PH 值5—5.5。
四、 硅藻土吸附。按酸化后尿液量1的比例，加入预先清洗处理成中性的硅藻土，在5℃下吸附数小时。
五、 洗脱。先把硅藻土吸附物用5℃的凉水洗涤1次，然后装入硅藻土柱(柱比1.1)中，用0.02％的氨水洗涤，使洗出液由浑变清，立即再用0.02的氨水和0.1m的氯化钠溶液洗涤。当硅藻土柱上淌出的水由清交浑时，即开始收集尿激酶。
六、 将成品尿激酶送检验单位检验活性后，就可以出售给粗品收购厂商或者生化制药公司