2     材料与方法
2.1      实验材料
   
豇豆（cowpea）；架芸豆（frame beans）及旱稻（upland rice）。
曼陀罗（Datura stramonium L.）为白花种，于怀柔市郊采集当年生的植株，分为茎、叶、花三类后以叶为生物碱提取材料，阴干96小时后粉碎，备用。
2.2      实验器材
大烧杯（8个）         : 盛放蒸馏水和曼陀罗生物碱水提液
三角烧杯（7个）、     ：盛放曼陀罗生物碱水提液
培养皿（63个无盖）：种植种子
双氧水（1瓶）         ：清洗种子
漏斗、                 ：过滤生物碱水提液
滤纸、                 ：过滤生物碱水提液和培养种子
剪刀、                 ：将曼陀罗植株分类
手套、                 ：防止手部皮肤接触有害液体
脱脂棉、             ：培养种子    
镊子、                 ：挑选提取种子
量筒、                 ：量取配置适量液体    
1ml滴管             ：配置液体浓度
     玻璃棒                 ：搅拌


<?xml:namespace prefix = v ns = "urn:schemas-microsoft-com:vml" />2.3    曼陀罗生物碱提取液的配置
   采用水提法将研碎的曼陀罗叶片用天平称出50克，配以？？？？克蒸馏水
实验步骤：
2.3.1 将过滤后的曼陀罗生物碱水提液配置成不同浓度后备用。
第一次实验（高浓度）的不同浓度的原液和水的对照：
表 1
（可耐的表发不上来了......） <?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /> <?xml:namespace prefix = w ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:word" />

2.3.2     培养皿的准备和摆放
准备63个培养皿洗净后铺好滤纸，每个培养皿内铺3张滤纸，把准备好的培养皿平均分成3组，每组7列3行共21个培养皿。如图1所示
图 1
（可耐的图图......）

每天用相应浓度的溶液浸泡材料，液体的高度以浸泡种子的2/3为标准，以保持滤纸的湿度和浓度不变。每天记录种子生长情况，发芽数（以露白为标准），测量胚根的长度。计算发芽率、发芽势、发芽指数。活力指数，并对所测量出的数据进行分析。
计算公式如下：
发芽率：GR=(n/N)*100%(n为最终达到的正常发芽粒数；N为供试种子数)
发芽势：GE=(n4/N)*100%(n4为种子发芽第四天的正常发芽种子数；         N为供试种子数）
发芽指数：GI=∑Gt/Dt(Gt为处理后t日的发芽数，Dt为响应的发芽天数)；


有两楼抽掉了......

不管，咱继续：
3. 结果与分析
3.1   曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的影响
表3   曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的影响（第一次实验数据）
由表3结果可以得出：曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的化感作用为抑制作用，降低了发芽率、发芽势及发芽指数，抑制了萌发及胚根的生长，溶液与水对照相比差异显著。胚根长度分别为对照的


3.2       曼陀罗生物碱水提液对架芸豆种子萌发的影响
表4   曼陀罗生物碱水提液对架芸豆种子萌发的影响（第一次实验数据）
由表4结果可以得出：曼陀罗生物碱水提液对架芸豆种子萌发的化感作用为抑制作用，降低了发芽率、发芽势及发芽指数，抑制了萌发及胚根的生长，溶液与水对照相比差异显著。胚根长度分别为对照的


3.3       曼陀罗生物碱水提液对旱稻种子萌发的影响
表5   曼陀罗生物碱水提液对旱稻种子萌发的影响
由表5结果可以得出：曼陀罗生物碱水提液对旱稻种子萌发的化感作用为抑制作用，降低了发芽率、发芽势及发芽指数，抑制了萌发及胚根的生长，溶液与水对照相比差异显著。胚根长度分别为对照的


因见相关报道显示，低浓度曼陀罗生物碱提取液对植物种子的萌发有促进作用，所以重新设置浓度进行第二次试验。实验浓度为0.5g/L,1g/L,2g/L,3g/L,4g/L,5g/L.。实验结果见下表。
3.4     曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的影响
表6   曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的影响（第二次试验数据）
由表6结果可以得出：曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的化感作用为抑制作用，降低了发芽率、发芽势及发芽指数，但没有使植物停止生长，并不是完全的抑制，溶液与水对照相比差异显著。


3.5     曼陀罗生物碱水提液对架芸豆种子萌发的影响
表7   曼陀罗生物碱水提液对架芸豆种子萌发的影响（第二次试验数据）
由表7结果可以得出：曼陀罗生物碱水提液对架芸豆种子萌发的化感作用为抑制作用，降低了发芽率、发芽势及发芽指数，但没有使植物停止生长，并不是完全的抑制，溶液与水对照相比差异显著。


3.6      曼陀罗生物碱水提液对日本晴种子萌发的影响
表8   曼陀罗生物碱水提液对日本晴种子萌发的影响
由8结果可以得出：曼陀罗生物碱水提液对日本晴种子萌发的化感作用为抑制作用，降低了发芽率、发芽势及发芽指数，但没有使植物停止生长，并不是完全的抑制，溶液与水对照相比差异显著。


初稿完结~~下面献上最终版本（中间还有一个版本的，我懒得发了，可耐的图图和表表都被和谐了，我也没必要发那么多了）：
曼陀罗生物碱水提液对几种植物种子萌发的影响
摘要 ：本文以白花曼陀罗生物碱水提液对几种植物种子的化感作用作为课题展开研究。以豇豆、架芸豆及旱稻为供试材料，利用培养皿滤纸法研究了不同浓度的白花曼陀罗叶片提取液对其种子萌发的影响。结果表明，曼陀罗叶片提取液对三种植物种子萌发均有化感作用，不同浓度的提取液对植物化感作用的强度不同。高浓度（5g/ L、10 g/ L、15 g/ L、20 g/ L、30 g/ L、40g/ L）的提取液降低了三种植物种子的萌发率、发芽势、发芽速度和胚根的长度，表现出了明显的抑制作用；低浓度(0.5 g/L、1g/ L、2g/ L、3g/ L、4g/ L、5 g/ L)的提取液对三种植物种子的萌发率、发芽势、发芽速度和胚根的长度，表现出了抑制作用，但抑制作用明显减弱，当提取液的浓度降到0.5 g/L、1 g/L 时，对旱稻表现出了不同程度的促进作用。
关键词：曼陀罗 化感作用 生物碱 种子萌发
1引言
曼陀罗（Datura Stramonium L.）为茄科一年生草本植物，原产于印度，现广泛分布于温带和热带地区，多生于田边、路边及宅旁等地，资源丰富[1]。从曼陀罗中已经分离到的次生代谢物主要是生物碱，其次还有黄酮、多糖、血球凝集素、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、肉豆蔻酸、二氢荧光素等多种成分[2-4]。其中的主要活性成分为生物碱，它对多种疾病有很好的治疗作用，其杀虫、抑菌的研究报道也较多[5-7]。但对植物生长发育影响的相关研究相对较少，仅见其水提物对3种植物的生长有抑制作用[8]，提示了曼陀罗水浸物中含有能够产生生物学效应的植物生长调节物质。1937年，H.Molisch提出了化感作用的定义，其定义为：所有类型植物（含微生物）通过释放化学物质到环境中而产生对其他植物直接或间接的有害作用或有益作用，这一定义首次说明植物化感作用的本质是植物通过向体外释放化学物质而影响邻近植物的，这一影响分为有益和有害两个方面[9]。那么曼陀罗叶片提取液对豇豆、架芸豆及水稻植物种子有什么样的影响呢？同时，孔垂华提到化感物质必须是经自然途径进入环境的化学物质，目前有很多学者通过有机溶剂浸提化感物质显然是错误的[10]。在自然状态下，除了水以外，不可能有其他物质将植物中的化感物质淋溶出来。植物化感物质的研究和从植物中提取天然产物或确定植物的化学成分有着本质的区别。因此本文以曼陀罗叶片作为提取生物碱的材料来源，以水提法得到生物碱粗提液，探讨了曼陀罗生物碱提取液浸泡种子对植物种子萌发的影响，旨在拓展曼陀罗这种野生植物资源的应用途径，并为研发天然植物生长调节物质提供理论和实践依据。
2     材料与方法
2.1 实验器材   
仪器：大烧杯（8个）、三角烧杯（7个）、培养皿（63个）、漏斗、剪刀、手套、滤纸、脱脂棉、镊子、量筒、滴管、玻璃棒、双氧水。
材料：豇豆（Vigna   unguicculata）品种为穗丰8号；架芸豆（Phaseolus   vulgarisL）品种为512，两种豆科植物的种子均从中国农业科学院购买；旱稻（Oryza）品种为日本晴，由中国科学院遗传所提供。
曼陀罗（Datura stramonium L.）为白花种，于怀柔市郊采集当年生的植株，分为茎、叶、花三类后以叶为生物碱提取材料。
2.2 曼陀罗生物碱提取液的制备
将曼陀罗叶片在室温下阴干后，用天平称取50g于大烧杯中，加入蒸馏水至水刚刚浸过叶片，48小时后过滤至三角瓶中。以此为母液，配制成不同浓度的处理液备用。浸泡程中用玻璃棒搅拌几次。首先，我将曼陀罗提取液配制成了较高浓度的处理液，分别为5g/L、10g/L、15g/L、20g/L、30g/L、40g/L；之后，将曼陀罗提取液配制成了低浓度的处理液，分别为0.5g/L、1g/L、2g/L、3g/L、4g/L、5g/L。
2.3材料的处理及培养
分别挑选籽粒饱满、大小一致的豇豆种子、架芸豆种子、旱稻种子，用双氧水消毒并用蒸馏水清洗后均匀播于放有滤纸的培养皿中，分别加入不同浓度的曼陀罗提取液进行培养。实验设置水对照组，也就是一共七个浓度梯度，每个浓度设置三个实验重复。鉴于种子大小不同，豇豆每皿15颗，架芸豆每皿10颗，
旱稻每皿20颗。如下图所示：


每天用相应浓度的溶液浸泡种子，液体的高度以浸泡种子的2/3为标准，以保持滤纸的湿度和浓度不变。每天记录种子生长情况，发芽数（以露白为标准），测量胚根的长度。然后，计算发芽率、发芽势、发芽指数，并对所测量出的数据进行统计分析。
计算公式如下：
发芽率：GR=(n/N)*100%(n为最终达到的正常发芽粒数；N为供试种子数)
发芽势：GE=(n4/N)*100%(n4为种子发芽第四天的正常发芽种子数；         N为供试种子数）
发芽指数：GI=∑Gt/Dt(Gt为处理后t日的发芽数，Dt为相应的发芽天数)。
3. 结果与分析
3.1   高浓度的曼陀罗生物碱水提液对三种植物种子萌发的影响
用浓度分别为0g/L、5g/L、10g/L、15g/L、20g/L、30g/L、40g/L的曼陀罗水提液培养三种植物种子，发现曼陀罗水提液对三种植物种子的化感作用表现为明显的抑制作用，并且随着水提液浓度的提高，抑制作用明显增强。
3.1.1     高浓度的曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的影响
表1   高浓度的曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子萌发的影响


由表1可以看出：曼陀罗生物碱水提液对豇豆种子的萌发有抑制作用，降低了发芽率、发芽势及发芽指数，抑制了种子萌发及胚根的生长。水对照组的发芽率为98%，根长为4.89cm，当水提液浓度增加为5g/L时，发芽率降到了49%，根长只有1.11cm，发芽指数也由43.30降到了18.48，当水提液的浓度继续增加时，种子的萌发受到了更大的影响，各个指数明显降低，可以说与水对照组相比差异十分显著。由表2，将各浓度下的根长、发芽率、发芽势及发芽指数与水对照进行比较，其比值均小于1。
对第3、4、5天的根长进行测量，随着水提液浓度的增加，根长明显降低，当浓度大于15g/L后，根长近乎为0，如图1所示。