七甲川吲哚花菁染料为其N-烷基侧链不同链长(n＝1-12)，且末端为羧基的七甲川吲哚花菁染料类似物。步骤a所述N,N'-二环己基碳酰亚胺：N-羟基琥珀酰亚胺：七甲川吲哚花菁染料的摩尔比为3:3:0.5-3，所述七甲川吲哚花菁染料：双氨基聚乙二醇的摩尔比为1:2-4。步骤b所述N,N'-二环己基碳酰亚胺：N-羟基琥珀酰亚胺：叶酸的摩尔比为在3:3:0.5-3。IR-808-PEG，和FA-NHS的摩尔比为1:2-4。
通过聚乙二醇(PEG)修饰解决了染料的水溶性问题，降低了染料潜在的毒副作用，提高了其临床应用的潜能；通过叶酸(FA)修饰增强了荧光探针对是对高表达叶酸受体的主动靶向性，可作为细胞检测的试剂盒。