1,目的蛋白差不多172Kda,筛选菌种确定目的蛋白有拷贝(做过菌落pcr)。
2,现在情况是:BMGY/BMMY体系;生长条件参考赛默飞手册(29℃,250rpm,10%装液量);摇瓶发酵后用酸洗玻璃珠提取;结果电泳没有明显目的蛋白条带(175kda那附近有带,但是诱导0也有还随着诱导时间降低,明显不对。),上清液内只有一条70kda浅带(还没做浓缩,不过这个大小估计分泌不了)。
我们只是想要个大概原因和处理,现在是在猜内分泌时菌体直接利用了#毕赤酵母发酵#
2,现在情况是:BMGY/BMMY体系;生长条件参考赛默飞手册(29℃,250rpm,10%装液量);摇瓶发酵后用酸洗玻璃珠提取;结果电泳没有明显目的蛋白条带(175kda那附近有带,但是诱导0也有还随着诱导时间降低,明显不对。),上清液内只有一条70kda浅带(还没做浓缩,不过这个大小估计分泌不了)。
我们只是想要个大概原因和处理,现在是在猜内分泌时菌体直接利用了#毕赤酵母发酵#