鉴于circrna通常作为miRNA海绵发挥作用，研究了circNOLC1是否可以在CRC进展过程中与miRNA结合。Anti-AGO2 IP分析发现circNOLC1显著富集（图1a）。通过生物信息学分析，发现有7个潜在的miRNA可与circNOLC1结合，其中miR-212-5p是唯一一个报道与CRC转移相关的肿瘤抑制因子，其表达水平在CRC细胞系中显著下调。circRIP实验发现circNOLC1和miR‐212‐5p在复合物中特异性富集，与生物素偶联的miRNA pull-down结果一致（图1b-c）。双荧光素酶实验结果也证实二者存在结合（图1d）。进一步实验显示抑制miR‐212‐5p上调c‐Met表达水平。
接下来，评估了circNOLC1在CRC中上调的原因。三个独立的数据库预测均发现NOLC1启动子包含YY1的结合基序（图1e）。ChIP分析验证了YY1与NOLC1启动子直接结合（图1f），YY1上调circNOLC1水平（图1g）；同时circNOLC1促进HuR的表达部分增强了NOLC1 mRNA的稳定性（图1h-i）。
图1
全文分享可查阅：【《Adv Sci》解读：极为少见！CircNOLC1同时与AZGP1和miR-212-5p结合调控促进结直肠癌肝转移】。
接下来，评估了circNOLC1在CRC中上调的原因。三个独立的数据库预测均发现NOLC1启动子包含YY1的结合基序（图1e）。ChIP分析验证了YY1与NOLC1启动子直接结合（图1f），YY1上调circNOLC1水平（图1g）；同时circNOLC1促进HuR的表达部分增强了NOLC1 mRNA的稳定性（图1h-i）。
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