#01碘-碘化钾（I2-KI）溶液 碘-碘化钾（I2-KI）溶液，作为植物组织化学测定的关键试剂，能有效将淀粉染成蓝紫色，蛋白质呈现黄色。 配制方法：取碘化钾2g，先溶解于少量蒸馏水中，完全溶解后加入碘1g，充分振荡至溶解，稀释至300ml蒸馏水，储存于棕色玻璃瓶中。使用时，建议稀释2至10倍，以避免染色过深，确保染色效果更为理想。 #02苏丹Ⅲ染色剂 苏丹Ⅲ（SudanⅢ或Ⅳ）染色剂，能够显著将木栓化、角质化的细胞壁以及脂肪、挥发油、树脂等成分染

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蛋白酶抑制剂的作用原理是什么？ 蛋白酶抑制剂（protease inhibitor）从广义上指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合，使蛋白酶活力下降，甚至消失，但不使酶蛋白变性的物质。 蛋白酶抑制剂有哪些使用条件？ 1. 因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。 2. 由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，应注意在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂时应充分混匀，以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。 常用的蛋白酶抑制剂有哪些？

1. 上样：样品加载： 上样量：细胞：10ug，组织：20ug，标记物上样量：2ul。 2. 电泳：分离胶浓度：常见有10%、9%和6%（大分子量选用浓度较低的胶，小分子量则相反）。浓缩胶浓度：5%。 电泳缓冲液配制：将100ml母液加入900ml蒸馏水，再加入1g SDS。 电泳条件：运行浓缩胶条件为80v，40min；运行分离胶条件为120v，50min。 3. 转膜：电转液：100ml母液+700ml蒸馏水+200ml甲醇（1）将PVDF膜在100%甲醇中浸泡10秒至15秒。 （2）倒入配置好的转印缓冲液于平底托盘中，将

RT-PCR的过程确实以RNA为模板进行扩增，但这个过程包括两个主要步骤： 逆转录：使用逆转录酶（Reverse Transcriptase, RT）将RNA模板逆转录成cDNA。逆转录酶能够利用RNA为模板合成与之互补的DNA链。 PCR扩增：逆转录得到的cDNA作为模板，随后进行PCR扩增。在PCR过程中，DNA聚合酶用来合成大量的DNA拷贝，这一步骤是针对cDNA而不是原始RNA模板进行的。 为什么不以RNA为模板进行扩增呢？ 1 PCR技术依赖于DNA聚合酶，而这种酶只能催化DNA链的合成，不能直接使用RNA作

实验步骤： 一、细胞复苏 1.从液氮中取出保存的细胞，放入一次性手套于37℃水浴锅中摇晃快速溶解，大约1 min； 2.1000 rpm离心5 min； 3.吸出冻存液，加入相应的细胞培养液重悬细胞； 4.然后转移到培养瓶中，添加足量的培养液； 5.放入5%CO2、37℃培养箱中培养，隔天更换新的培养液。 注意事项：1.从液氮罐中取出细胞时，应做好个人防护以免冻伤；2.冻存细胞取出后，如不能立即放入水浴锅中融化，需将其放在干冰上保存转移；3.细胞水浴解冻时间以1min

在细胞培养的过程中支原体污染是一个让人头疼的问题。它如同一个“不速之客”，悄然潜入细胞培养体系，给我们的实验带来诸多困扰。你是否有过这样的经历，培养的细胞无声无息地就被毁掉了？实验数据很难重复？ 那么，当我们遭遇支原体污染时，该如何应对呢？今天，让我们一起来探讨这个困扰。 支原体是一种直径大小仅为0.1-0.3μm，无细胞壁，可轻松透过一般过滤膜混入培养系统中的最小最简单的原核生物，呈高度多形性，有球形、杆形、

1 什么是PCR？ PCR（聚合酶链式反应）是一种分子生物学中用于快速复制大量特定DNA片段的技术。它由Kary Mullis在1983年发明，因此他获得了1993年的诺贝尔化学奖。PCR的基本步骤包括三个主要阶段：变性、退火和延伸，这些步骤在一个循环过程中重复进行，以指数方式增加目标DNA的数量。 1 变性（Denaturation）：在这个阶段，双链DNA被加热至高温（通常是94°C至98°C），导致氢键断裂，使得DNA双链分离成两条单链。2 退火（Annealing）：随后，温度降低至50°C至

在实验室工作中，转膜是一个非常重要的步骤。那么，转膜技巧的关键你知道是什么吗？ 首先，选择合适的膜是关键之一。不同的膜具有不同的特点，需要根据实验的具体需求进行选择。转移分子量小于20kDa的蛋白时建议使用小孔径的膜 (如0.22μm)，正常情况下使用0.45μm孔径的膜即可。 其次，正确的缓冲液配制也至关重要。它会影响到蛋白的转移效果。转膜过程会伴随严重的发热现象，建议提前配好缓冲液并在4 ℃冰箱进行预冷。建议在4 ℃条件下进