小白刚开始跑wb，请问这是什么情况

第二条中间有一道斜着断口是啥原因呀 各位大佬

相比于预制的梯度凝胶，在自制的固定浓度凝胶中，预染蛋白质分子量标准的条带会看起来显得略粗一些，而不如前者锐利。当条带较粗的时候，我们的实践经验显示，分子量的参考一般应以条带的上半部为准。 有些小伙伴的WB结果参照蛋白Marker，与预期大小不符，第一反应就是Marker不准。那么除了我们之前分析的预染蛋白Marker本身的准确性的问题，还有没有其他原因呢？ SDS-PAGE凝胶电泳按照分子量大小将蛋白分离，是蛋白在充分变性、还原条件下，

预染蛋白Marker，染料的标记反应和蛋白质的其它标记反应一样，其实际标记效率由于各种各样的因素而波动于一个合理的区间，不是一个确定的常数。在预染蛋白Marker的生产过程中，染料标记效率的波动将直接影响到最终标记产物的分子量大小。因此厂商都有一套优化的条件来实现相对稳定的染料标记效率。即使如此，标记效率的稳定性仍然不可能达到一个稳定的常数，仅能将其控制在一个比较小的波动范围。其结果是，染料标记的蛋白质产物的分子

预染蛋白Marker，又分单色预染Marker、双色预染Marker，多色预染Marker。如图： 单色预染蛋白Marker通常会加深某些条带的粗细，方便我们快速记忆和区分各个条带的大小。而彩色蛋白Marker则用不同的颜色，更加方便记忆区分。 除了上面介绍的，市面上还有一些其他类型的蛋白Marker：如显影蛋白Marker等。 显影蛋白Marker，蛋白条带中含有lgG结合位点，lgG结合位点会结合用于检测靶蛋白的一抗或二抗，使得蛋白Marker在印迹膜上可与目的条带一同呈现。

目前最常用的蛋白Marker分为非预染蛋白Marker、预染蛋白Marker。 *非预染蛋白Marke 是几种已知分子量并纯化好的蛋白质预混液。非预染Marker在电泳过程中看不到，电泳结束后经过蛋白染色后才能起指示作用，无法在实验过程中起预示作用。但是由于蛋白没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，所以最准确。 *预染蛋白Marker 是纯化好的几种蛋白，通过与染料共价耦联后混合在一起，在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到的一

各位大佬，帮忙看一下HO-1跑出来条带这个样子，是什么原因？ 奶粉封闭，4度过夜 一抗1:1000，37度2h 二抗1:5000，37度2h

本人新手，我用的15%的一步制胶法，开始跑胶之后，发现有一部分条带下面那红色的部分是亮晶晶的，跟一般的颜色不一样，请问大佬是什么原因啊！！

WB可以干嘛咧 （1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质； （2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达

各位大佬，实验垃圾一个，请问蛋白定量散点图做出来后，怎么计算电泳蛋白上样量，要哭了

如题

westernblot实验中曝光时未见条带，但预染marker条带清楚，可能什么原因造成？怎么解决？

请问买来的成品剃度胶如何将胶取出，在线等，比较急

关于SDS-PAGE 蛋白电泳的常见问题分析 1. 关于凝胶的一些问题 1. 胶的凝结不好，例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下，在分离胶的下部有波浪样的花纹，凝胶不均匀。解决方法：加大 TEMED 和过硫酸胺的量，使其凝结速度加快。同时洗干净玻璃板，防止有残留的胶干结在玻璃板上。 2. 胶不凝，解决方法：温度较低时加大 TEMED 和过硫酸胺的量，过硫酸胺必须新鲜配制。如若还是不行重新配制一下缓冲溶液。 3. 胶易碎，例如浓度较高的胶

有没有哪位童鞋在"万类"做过western blot的？靠谱吗？ 最近做western blot一直跑不出来目的条带，杂带也很多，所以想问问有没有靠谱的外包公司。麻烦大神留言～感激不尽

以前做过一段时间的WB，现在更是没接触了，在做细胞培养方面。 这个吧估计很少人来，emmmm，wb实验过程

今天从早上开始配胶，配了一天，全部失败，原因大部分就是胶凝的时候会出现一道痕。。。我们称之为花了。。。到底是什么原因呢？求大神指点！

提起Western blot，大家会不禁联想到Southern blot和Northern blot。其实它们的名字也是个有趣的故事。1975年，Edwin